日本理化學(xué)研究所的一個(gè)研究小組開發(fā)出稱為“RADICL-seq”(RNA And DNA Interacting Complexes Ligated And sequence)的方法,可在整個(gè)基因組中全面檢測(cè)細(xì)胞核內(nèi)RNA和基因組DNA(染色質(zhì))之間的相互作用。
科學(xué)家對(duì)很多被稱為“長(zhǎng)鏈非編碼RNA (lncRNA)”在內(nèi)的RNA功能尚不了解。而了解RNA功能,必須了解由DNA和組蛋白組成的染色質(zhì)區(qū)域與RNA的相互作用。
從DNA轉(zhuǎn)錄的RNA分為兩種,一種是具有制造蛋白質(zhì)信息的信使RNA(mRNA),另一種是不具備制造蛋白質(zhì)信息的非編碼RNA(ncRNA,非編碼RNA)。在ncRNA中,長(zhǎng)度超過200個(gè)堿基的RNA被稱為“長(zhǎng)鏈非編碼RNA”。ncRNA的一部分參與體內(nèi)的各種過程,包括轉(zhuǎn)錄和翻譯,以及通過由DNA和組蛋白組成的“染色質(zhì)”的結(jié)構(gòu)變化調(diào)節(jié)基因表達(dá)(染色質(zhì)重塑)。
新方法首先用甲醛固定細(xì)胞核內(nèi)存在的RNA、蛋白質(zhì)和DNA,然后通過獨(dú)特設(shè)計(jì)的銜接子序列連接RNA和DNA。之后去除固定的蛋白質(zhì),僅提取結(jié)合到銜接子的RNA和DNA。通過下一代基因測(cè)序器讀取這些基因,然后將其定位到基因組中。這樣可全面了解附近存在的DNA和RNA。
研究小組開發(fā)的方法可以同時(shí)捕獲各種核RNA的信息,包括在調(diào)節(jié)基因組DNA的基因表達(dá)和維持染色質(zhì)結(jié)構(gòu)中起重要作用的RNA,以及與它們相互作用的基因組區(qū)域。通過這種方法獲得的數(shù)據(jù)還可以用于檢查染色質(zhì)如何組織和調(diào)節(jié),并提供lncRNA功能的全面評(píng)估。今后有望作為研究核內(nèi)RNA的技術(shù)被廣泛應(yīng)用。
研究成果2月24日發(fā)表在《自然通訊》雜志上。(記者 陳超)
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